CDM4Retino 细 产品处理 直接驯化 低温冻存： 胞 培CDM4Retino干粉培养基(SH30519)养的配制:方法
1.在不断搅拌的情况下，将SH30519介加入到细胞培养级超纯水中（室绍温），达到终体积的90%，终体积时
1.将当前培养基中培养的细胞直接转移到CDM4Retino培养基中，接种密度为5.0×105个细胞/毫升。

2.当存活的细胞密度达到2.0–4.0×106个细胞/毫升的时候，进行细胞传代。

1.CDM4Retino驯化细胞可以冻存于由新鲜培养基与CDM4Retino条件培养基等体积混合的培养基中。
加入终浓度为10.0%的DMSO。
质量控制检测 规格* 浓度为13.7g/L。
混合均匀直至完全溶 外观 溶液清澈 解。

3.每48-96小时传代一次。
渗透压 290–340
mOsm/kg pH 7.0–7.4
2.加入1.0g/LPluronicF68和2.0g/L4.如果细胞存活率低于80%，则进行无菌情况 无生长（细菌或真菌） 碳酸氢钠。
混合20分钟。
循序驯化。
内毒素 <10.0EU/mL* 应用 生长促进*
3.加细胞培养级超纯水补足至终体积。
继续混合10-20分钟。
循序驯化 *参见结果分析证明书
1.将当前培养基中培养的细胞以1：
1 4.检测pH和渗透压。
预期的值应为：的比率转移到CDM4Retino培养基 pH..................7.0-7.4 中，接种密度为5.0×105个细胞/毫 渗透压….......290–340mOsm/kg 升。

5.用无菌的滤器以及0.2微米孔径的无菌滤膜过滤到合适的容器中。
注意：CDM4Retino干粉不含L-谷氨酰胺。
推荐浓度：4mM。
常规培养建议
1.培养的细胞应该在37°C及5%CO2的环境中孵育。

2.孵育细胞直至观察到细胞数量翻了四倍。
将含有条件培养基的细胞悬液与新鲜的CDM4Retino培养基以1：1混合后进行传代。

3.继续使用这种方法进行传代，直至先前使用的培养基浓度降至0.05%以下，并且保证细胞存活率高于85%。

2.培养瓶的盖子应该拧松，且容器顶部要留出足够的空间进行气体交换。

3.在细胞已被驯化之后，接种密度应为3.0×105个细胞/毫升左右。
细胞应每隔3至5天传代一次。
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