细胞计数仪可视硬件及其功能介绍①外接硬件：（a）导电液桶，装4%的NaCl溶液（4克分析纯NaCl溶于超纯水中，并定容
至100ml，配置好后用0.5µm的过滤膜之后才能使用），连接导电液桶的管路顶端（仪器左侧面板）显示DILUENT，导电液桶连接有2个感应器（感应桶中导电液的量和高度，导电液不足，打开仪器软件时提示需要加注导电液）；（b）废液桶，连接桶的管路顶端显示WASTE，连接有1个感应器，若废液桶满，开软件时提示清空废液桶②仪器左侧面板3个按钮：最上策按钮调节视野、清晰度；中间按钮上下调节；最下按钮为左右调节。
调节效果以观测仪器正面左上窗口中间气泡状影像（小孔管的小孔）是否清洗为标准。
小孔中间出现黑影，表面小孔堵塞，需要点击软件主界面System/UnblockAperture反冲给小孔排堵③面板正面上方按钮，向上扭动按钮，搅拌子顺指针转动；向下扭动，搅拌子逆时针转动④控制搅拌子转动速度按钮，顺时针扭动，搅拌子转动加快；逆时针扭动，搅拌子转动变慢⑤样品室。
（a）电极：有两个，电极1一般固定，不经行调试；电极2（小孔管），根据样品颗粒大小选择合适孔径的小孔管（更换时参照更换小孔管实验步骤）。
小孔管上面按钮，顺时针或逆时针扭动可松开或固定小孔管。
小孔管上的小孔需要对准样品室左侧壁上的空洞，以便更好的观测小孔管上小孔状态（畅通还是堵塞）。
（b）搅拌子，起搅拌作用，使微颗粒均匀分布于导电液中。
搅拌子上面按钮起固定和松开搅拌子作用。
松开按钮，可对搅拌子固定的方向进行调节。
（c）样品杯，最多可加注150ml导电液，开始测定之前必须使样品颗粒均匀分布于导电液中。
（d）样品台，放置样品杯，可上下移动，依据实验要求调节固定的位置。
（e）陷阱，它的功能是用来防止大的密集的微粒进入系统，当样品的沉淀达到了红色标记就必须清洁陷阱。
（f）Lamp起照明作用，可让实验人员观测样品室中的样品，同时易于观察样品管中的小孔状态（畅通或堵塞）
二、样品信息及运行参数设置
（1）SampleInformation 点击SampleInformation下面的“Change”按钮，出现“EnterSampleInfo”界面，该界面下填写样品的基本信息。
GroupID组号或样品批号。
SampleID样品名称。
Operator实验者姓名。
BarCode填写NA。
Comment对样品进行评论、注释和说明。
RunNumber已经运行样
1 品的数量选择SampleInfromation/EditSampleInfo，出现EditSampleInfo界面。
选择“Volume”， 填写样品原始体积（液体样品，µl），ElectrolyteVolume，样品杯中总体积，AnalyticVolume分析样品的体积。
选择“Mass”，填写颗粒干粉的质量Density（g/ml）颗粒干粉溶于多少体积的导电液，同样ElectrolyteVolume表示样品杯中总体积，AnalyticVolume表示分析样品的体积
（2）SOM设置点击SOM下面的“Change”按钮，对运行参数进行设置，包括以下方面：ControlMode，Time框中填写数字，表示运行多长时间实验自动停止。
Volumetric框中填 写数字表示分析多少体积的样品后实验自动停止。
TotalCount框中填写数字表示分析多少颗粒后实验自动停止。
ModalCount框中填写数字表示峰值数达到多少实验自动停止。
Manual手动停止实验 选中“FlushApetureTubebeforefirstrun”，表示运行前清理小孔管。
NumberofRun循环测定同一样品的次数。
WaitBetweenRuns每2次测样之间等待的时间。
SaveAverageofAllRuns保存所有运行后的平均值。
PrintAverageReport打印报告。
点击“Aperture”图标，出现“ChangeApertureTube”界面，根据所使用小孔管的小孔直径大小作出选择。
点击“Threshold”图标，出现“SizingThreshold”界面，SizingThreshold框中填写数字（小孔直径大小╳2％），CountingThreshold框中填写数字（小孔直径大小╳2％）。
MeasureNoiseLevel测定背景噪音。
该值在2以下符合要求，一般主要测定导电液的背景噪音。
点击“Current&Gain”，出现CurrentGainSettings，设置小孔管的内外电极的电流，可直接点击AutoSet，也可根据不同规格小孔管所规定的电流值进行手动填写。
点击“Eletrolyte”，出现“SelectElectrolyteandDisperpent”界面，选择实验时所使用导电液的类型。
点击“Flush”，设置每个样品测定完成之后小孔管冲洗参数，一般选择“Defaults”即可。
点击“Directory”，设置保存文件的路径。
（3）Preview 该键的功能主要测试样品的颗粒浓度（对待测样品而言，浓度值在8％～10％为最佳）或者导电液的背景噪音（浓度值越小越好，表示导电液所含的杂质颗粒越少）
（4）Start，点击该按钮，开始测定样品
2
（5）Stirrer和Lamp选中Stirrer（Stirrer框中出现“√”号），搅拌子开始运行；选中Lamp（Stirrer框中出 现“√”号），仪器右侧面板上的灯亮，照亮样品室
（6）WasteTank指示废液桶中废液量的多少，当蓝色充满整个WasteTank框时，需要清空WasteTank中的废液
三、更换小孔管步骤
（1）软件主界面点击“Run/ChangeApertureTubeWizard”，出现“ChangeApertureTubeWizard”，显示第一步操作“Removethecurrentlyinstalledaperturetube”移去目前安装的小管。
具体方法：逆时针转动小孔管的紧固装置（180度）到“打开密封位置”，用力拉下小孔管。
（2）点击“Next”下一步“Installanewaperturetube”，选择合适要分析的样品的小孔管，将新的小孔管套在电极上，旋转180度卡紧小孔管，注意小孔管的小孔必须对准样品室左侧壁上的空洞，便于观测小孔状态（畅通或堵塞）
（3）点击“Next”下一步“Placeabeakerofcleanelectrolyteontheplatform”，在样品台上放置1杯清洁的导电液。
（4）点击“Next”下一步“Closethedoor”，将样品台升到合适的高度，关上样品间的门
（5）点击“Next”下一步“Selecttheelectrolytesolution”，在“Selecttheelectrolytesolution”界面Electrolyte下拉菜单中选择ISOTON
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（6）点击“Next”下一步“Selectthenewaperture”，出现“ChangeApertureTube”对话框，选中需要安装小孔管的类型和型号，点击“OK”
（7）点击“Next”下一步“Fillthesystem”，点击“Fillthesystem”仪器自动将管路充满电解液
（8）点击“Next”下一步“Adjustthemeteringpump”，点击“Meteringpump”按钮，仪器自动调整测量泵
（9）点击“Next”下一步“SetCurrentandgain”，点击“Current&Gain”，直接点击“AutoSet”，分析的是微颗粒，选择“Particles”，分析的是细胞，选择“Cells”，点击“OK”即可（10）点击“Next”下一步“Measurenoiselevel”，点击“MeasureNoise”测定空白电解液中的噪音水平（11）点击“Next”下一步“Calibration”，假如安装的小孔管是第一次使用，需要校验。
就在此时做，如是以前校验过的小孔管，现在可以做校验的再确认。
关于细节，参阅第5节。
假如没有必要校验，点击Next，点击Done四、校验和校验的再确认
（1）校验品的选择（不同粒径的校验品从Beckman公司购买） 小孔孔径检验品标称峰值推荐的CC校验品标称峰值 校验时所用的校验品和粒径范围
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（2）准备校验品向20ml规格ACCUVETTE加注适量电解液，滴入数滴校验品，样品杯放置在分析位置 （适合于孔径不大于100微米的小孔管）；孔径大于100微米的小孔管，需使用更大的样品杯
（3）状态面板点击“Preview”或点击“Run/Preview”，浓度显示条大小在8%~10%为合适，浓度太低，则需要向样品杯中加注校验品；浓度太高，用电解液进行稀释，直至浓度在合适范围
（4）运行校验品：点击主菜单Run/CalibrateAperture，出现对话框CalibrateSize，在校验品尺寸框中填入校验品的峰值，这个值可以在检验品的附带数据表中查到。
（5）点击“Start”按钮，当校验完成，点击“eptNewKd”，仪器校验完成。
校验文件一般存储在C：\MS目录下
（6）获得平均Kd值。
重复上述步骤
（1）～
（5），得到10个Kd数值，计算10次Kd值的平均值
（7）在小孔Kd值列表中输入平均值。
点击“Run/ChangeApertureWizard”，出现“ChangeApertureTubeWizard”对话框，选中Selectthenewaperturetube100µm后点击ApertureTube按钮，出现“ChangeApertureTube”对话框，选中所使用的小孔管（类型和型号一致），点击EditList，在“EditApertureTubeList”编辑列表中，点击校验的小孔尺寸，输入小孔管的序列号及平均值后，再点击Update即可
（8）校验的确认：样品杯中加适量电解液和数滴校验品－点击Preview确定微颗粒的浓度，接近10％为最佳（浓度低继续添加，浓度高用电解液稀释）－点击“Run/VerifyApertureCalibration”－在校验品尺寸框中输入校验品的峰值－点击“Start”－运行完成，对话框出现校验的状态。
如果校验的确认结果在范围之外，则重新进行校验
五、其它事项
（1）转换脉冲到粒径的设定：点击软件主界面Settings/ConvertPulsestoSizeSettings，出现“ConvertPulsestoSizeSettings”对话框，Sizebins在4～300之间选中；粒径分析范围为小孔管直径的2％～60％；BingSpacing选择数据分析时X轴的单位（分析颗粒直径或体积时，有对数和线性两种；MultisizerⅡEdit.这个功能和MultisizerⅡe是类似的，它是用来修正非垂直通过小孔管的微粒导致的误差，只在窄粒径分布时选用）。
该设置可在数据分析时或分析前进行设置
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（2）保存标准操作方法：SOM设置完成之后，点击软件主菜单Settings/SaveanSOM，文件可以存储在位于C:\MS\SOP目录下的SOM文件夹中。
没有数目的限制，保存下来的文件以便将来直接调用。
调用方法：主菜单中点击Settings，然后点击LoadRunSOM。
要改变标准操作方法，点击SOM下面的Change或Settings/ChangeSOM
（3）运行背景。
背景就是一个没有样品的电解液的分析，也可以称之为“空白分析”。
当分析低浓度的样品时，特别有必要进行背景的分析。
设置方法：（ａ）选择与分析样品时同样的设置和参数；（ｂ）在样品室分析部位放上有清洁电解液的样品杯；（ｃ）状态面板中点击“Start”按钮；（d）完成之后存储实验结果（需给背景实验结果命名）
（4）减去背景：（a）在主菜单中，点击“Settings/LoadBackgroundRun”；（b）选择背景文件，选中背景文件后直接点击“Open”，从现在开始，以后的分析将自动减除背景值。
要想去掉此功能，点击“Settings/RemoveBackgroundRun”
（5）使用400µm或更大的小孔管进行微粒浓度的测定：使用较大孔径的管测定颗粒时，使用体积控制模式没有实际意义（测量泵允许的最大体积为2ml，2ml体积的电解液通过小孔只需较短的时间，由于对于样品的合适浓度有限制，因此所计数的微粒数不足以得到一个好的统计结果，因而结果的重现性就比较差），因此多采用时间控制模式。
为避免高的流速造成的噪音，电解液加入甘油或蔗糖增加黏稠度，降低流速，同时有助于较重颗粒的悬浮。
时间控制模式下，必需人工测定流速之后（单位时间内样品杯中减少的电解液的体积：毫升/秒），才能测定微颗粒的浓度
六、仪器维护：每天分析生物样品、食物及腐蚀性液体的实验结束后，必需清洁仪器管路系统
（1）将电解液容器从仪器脱开
（2）在主菜单，点击System，点击DrainSystem
（3）在排空系统完成之后，放回电解液容器。
连接注明放清洁剂的容器。
对于生物或食物的应用，建议的清洁剂是CoulterClenz或2%的漂白剂。
对于其它的应用，蒸馏水就可以了
（4）在主菜单中，点击System，点击FillSystem
（5）重复步骤
（3）（6）让系统充满清洁液直至下一个工作日
（7）在下一个工作日使用仪器之前，重复步骤1到
4，但这时，要换回电解液。
6 七、数据分析
（1）SampleInformation/SOM设置完成之后，先点击Preview查看样品的浓度，在8％～10％为最佳
（2）点击“Start”，运行结束后，软件主界面右方下侧出现实验结果图。
图形顶端出现文件名（开始实验前进行SOM设置时给文件的命名），下方主菜单RunFile/Edit/View/Graph/Analyze/Display可对实验结果进行统计分析、图形可视化设置、文件存储等操作
（3）Runfile主菜单：①OpenforOverlay将2个或多个文件在同一窗口中打开，图形重叠更能直观判断不同样品之间的差异；②Save保存实验结果；③Saveas将实验结果进行另存；④Delete删除选中的文件；⑤Print打印；⑥PrintReport打印报告；⑦Reportpreview报告预览；⑧Printwindow打印窗口；⑨Exportdata输出数据，文件格式为XLS；⑩GetInfo获取运行该样品的信息，GetfileHistory获取文件历史信息
（4）View菜单：①Graph，选中实验结果以图形展示；②Listing，选中实验结果以列表形式显示；③Size，选中图形横坐标为微粒直径（µm），纵坐标可设置为数量、体积、表面积等参数；④Zoomin，图形放大；⑤Zoomout，图形回复默认值大小
（5）Graph菜单：①Number，表示图形Y轴为微颗粒数量；②Number%，表示不同直径大小的微颗粒数量占总数量的百分比；③Numberperml，每毫升所含微颗粒的数量；④Volume，微颗粒的体积；⑤Volume％，表示不同直径大小的微颗粒体积占总微颗粒体积的百分比；⑥Volumeperml，每毫升所含微颗粒的体积；⑦SurfaceArea微颗粒表面积；⑧SurfaceAreaperml每毫升所含微颗粒的表面积；⑨SurfaceArea％，表示不同直径大小的微颗粒表面积占总微颗粒表面积的百分比；⑩Number+Volume，数量＋体积（Y轴）；＋1）Number%＋Volume％，数量百分比＋体积百分比（Y轴）；＋2)X轴可更改为Volume（体积）、Area（表面积）和Diameter（直径）
（6）Analyze菜单：①Statistics统计分析结果；②LoadBackgroundRun选择运行空白对照样品的文件，点击打开，统计分析结果将自动减除背景值
（7）Display对图形可视化显示设置，包括图形显示种类的选择、X轴和Y轴的设置等方面
八、创建一个标准的操作流程（SOP）
（1）创建SOP之前先创建一个SOM和Preferences文件。
在SOM下Change中对SOM各参数进行设置，设置完成点击“Settings/SaveanSOM”（选择路径、给SOM文件命名）
（2）创建一个Preferences文件，点击主菜单Preferences对各项进行设置，包括PrintedReport
7 /Size/Trend/Pulse/ViewOption………最后点击SavePreferencesAs保存Preferences文件，也可直接点击SavePreferencesAsDefault，保存Preferences为默认值（参数设置为系统默认值）
（3）点击Settings/CreateanSOP，出现对话框，选择SOM文件和Preferences文件后点击Save保存SOP文件（选择保存路径及给文件命名）
（4）下次运行类似属性的实验时，直接点击Settings/LoadanSOP出现对话框，选择SOP文件，点击打开即可
（5）只需对SampleInformation进行编辑设置，无需对SOM进行设置
（6）先点击Preview，样品浓度符合要求，即可点击Start开始开展实验
九、仪器使用过程中注意事项
（1）搅拌子转速控制在10-12，11比较合适
（2）每测量120-140个样品时，最好执行drainsystem一次，以排除气泡
（3）当使用0.9%电解液测量直径在10µm以上的微颗粒时，背景值对结果的影响可以忽略不 计
（4）每次取样品杯时，速度不宜过快，否则容易产生气泡
（5）当界面提示Flowrateistoohigh，此时一般可以采用FlushAperturetube手段解决；当连 续两次提示Flowrateistoohigh，此时可以Fillsystem一次加以解决；超过两次时，建议drainsystem-fillsystem加以解决；问题仍然无法解决时，在主界面菜单中，选择system-Troubleshooting-purgemeteringpump，连续进行五次，然后再fillsystem
（6）机器左侧的废液桶和吸电解液桶，盖子一定要拧紧，如果较松，容易导致系统进入大量气泡，影响机器正常运行
（7）系统主界面左下方的wasteTank一般会在10-12个样品时自动清零，但若等系统自动清理时，会造成样品的重复测量，影响实验进度，同时还造成系统报错，因此建议当水条到达stirrer的最后一个字母时，手动清理废液
（8）系统清理废液时，可以取出样品杯，进行下一步的准备
（9）为提高仪器的正常快速使用，建议悬浮液中尽量不要包含大块的悬浮物（10）搅拌子的位置以位于样品的杯子中下部为适宜，不要靠近底部太近，否则容易产生大量的气泡
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调节效果以观测仪器正面左上窗口中间气泡状影像（小孔管的小孔）是否清洗为标准。
小孔中间出现黑影，表面小孔堵塞，需要点击软件主界面System/UnblockAperture反冲给小孔排堵③面板正面上方按钮，向上扭动按钮，搅拌子顺指针转动；向下扭动，搅拌子逆时针转动④控制搅拌子转动速度按钮，顺时针扭动，搅拌子转动加快；逆时针扭动，搅拌子转动变慢⑤样品室。
（a）电极：有两个，电极1一般固定，不经行调试；电极2（小孔管），根据样品颗粒大小选择合适孔径的小孔管（更换时参照更换小孔管实验步骤）。
小孔管上面按钮，顺时针或逆时针扭动可松开或固定小孔管。
小孔管上的小孔需要对准样品室左侧壁上的空洞，以便更好的观测小孔管上小孔状态（畅通还是堵塞）。
（b）搅拌子，起搅拌作用，使微颗粒均匀分布于导电液中。
搅拌子上面按钮起固定和松开搅拌子作用。
松开按钮，可对搅拌子固定的方向进行调节。
（c）样品杯，最多可加注150ml导电液，开始测定之前必须使样品颗粒均匀分布于导电液中。
（d）样品台，放置样品杯，可上下移动，依据实验要求调节固定的位置。
（e）陷阱，它的功能是用来防止大的密集的微粒进入系统，当样品的沉淀达到了红色标记就必须清洁陷阱。
（f）Lamp起照明作用，可让实验人员观测样品室中的样品，同时易于观察样品管中的小孔状态（畅通或堵塞）
二、样品信息及运行参数设置
（1）SampleInformation 点击SampleInformation下面的“Change”按钮，出现“EnterSampleInfo”界面，该界面下填写样品的基本信息。
GroupID组号或样品批号。
SampleID样品名称。
Operator实验者姓名。
BarCode填写NA。
Comment对样品进行评论、注释和说明。
RunNumber已经运行样
1 品的数量选择SampleInfromation/EditSampleInfo，出现EditSampleInfo界面。
选择“Volume”， 填写样品原始体积（液体样品，µl），ElectrolyteVolume，样品杯中总体积，AnalyticVolume分析样品的体积。
选择“Mass”，填写颗粒干粉的质量Density（g/ml）颗粒干粉溶于多少体积的导电液，同样ElectrolyteVolume表示样品杯中总体积，AnalyticVolume表示分析样品的体积
（2）SOM设置点击SOM下面的“Change”按钮，对运行参数进行设置，包括以下方面：ControlMode，Time框中填写数字，表示运行多长时间实验自动停止。
Volumetric框中填 写数字表示分析多少体积的样品后实验自动停止。
TotalCount框中填写数字表示分析多少颗粒后实验自动停止。
ModalCount框中填写数字表示峰值数达到多少实验自动停止。
Manual手动停止实验 选中“FlushApetureTubebeforefirstrun”，表示运行前清理小孔管。
NumberofRun循环测定同一样品的次数。
WaitBetweenRuns每2次测样之间等待的时间。
SaveAverageofAllRuns保存所有运行后的平均值。
PrintAverageReport打印报告。
点击“Aperture”图标，出现“ChangeApertureTube”界面，根据所使用小孔管的小孔直径大小作出选择。
点击“Threshold”图标，出现“SizingThreshold”界面，SizingThreshold框中填写数字（小孔直径大小╳2％），CountingThreshold框中填写数字（小孔直径大小╳2％）。
MeasureNoiseLevel测定背景噪音。
该值在2以下符合要求，一般主要测定导电液的背景噪音。
点击“Current&Gain”，出现CurrentGainSettings，设置小孔管的内外电极的电流，可直接点击AutoSet，也可根据不同规格小孔管所规定的电流值进行手动填写。
点击“Eletrolyte”，出现“SelectElectrolyteandDisperpent”界面，选择实验时所使用导电液的类型。
点击“Flush”，设置每个样品测定完成之后小孔管冲洗参数，一般选择“Defaults”即可。
点击“Directory”，设置保存文件的路径。
（3）Preview 该键的功能主要测试样品的颗粒浓度（对待测样品而言，浓度值在8％～10％为最佳）或者导电液的背景噪音（浓度值越小越好，表示导电液所含的杂质颗粒越少）
（4）Start，点击该按钮，开始测定样品
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（5）Stirrer和Lamp选中Stirrer（Stirrer框中出现“√”号），搅拌子开始运行；选中Lamp（Stirrer框中出 现“√”号），仪器右侧面板上的灯亮，照亮样品室
（6）WasteTank指示废液桶中废液量的多少，当蓝色充满整个WasteTank框时，需要清空WasteTank中的废液
三、更换小孔管步骤
（1）软件主界面点击“Run/ChangeApertureTubeWizard”，出现“ChangeApertureTubeWizard”，显示第一步操作“Removethecurrentlyinstalledaperturetube”移去目前安装的小管。
具体方法：逆时针转动小孔管的紧固装置（180度）到“打开密封位置”，用力拉下小孔管。
（2）点击“Next”下一步“Installanewaperturetube”，选择合适要分析的样品的小孔管，将新的小孔管套在电极上，旋转180度卡紧小孔管，注意小孔管的小孔必须对准样品室左侧壁上的空洞，便于观测小孔状态（畅通或堵塞）
（3）点击“Next”下一步“Placeabeakerofcleanelectrolyteontheplatform”，在样品台上放置1杯清洁的导电液。
（4）点击“Next”下一步“Closethedoor”，将样品台升到合适的高度，关上样品间的门
（5）点击“Next”下一步“Selecttheelectrolytesolution”，在“Selecttheelectrolytesolution”界面Electrolyte下拉菜单中选择ISOTON
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（6）点击“Next”下一步“Selectthenewaperture”，出现“ChangeApertureTube”对话框，选中需要安装小孔管的类型和型号，点击“OK”
（7）点击“Next”下一步“Fillthesystem”，点击“Fillthesystem”仪器自动将管路充满电解液
（8）点击“Next”下一步“Adjustthemeteringpump”，点击“Meteringpump”按钮，仪器自动调整测量泵
（9）点击“Next”下一步“SetCurrentandgain”，点击“Current&Gain”，直接点击“AutoSet”，分析的是微颗粒，选择“Particles”，分析的是细胞，选择“Cells”，点击“OK”即可（10）点击“Next”下一步“Measurenoiselevel”，点击“MeasureNoise”测定空白电解液中的噪音水平（11）点击“Next”下一步“Calibration”，假如安装的小孔管是第一次使用，需要校验。
就在此时做，如是以前校验过的小孔管，现在可以做校验的再确认。
关于细节，参阅第5节。
假如没有必要校验，点击Next，点击Done四、校验和校验的再确认
（1）校验品的选择（不同粒径的校验品从Beckman公司购买） 小孔孔径检验品标称峰值推荐的CC校验品标称峰值 校验时所用的校验品和粒径范围
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（2）准备校验品向20ml规格ACCUVETTE加注适量电解液，滴入数滴校验品，样品杯放置在分析位置 （适合于孔径不大于100微米的小孔管）；孔径大于100微米的小孔管，需使用更大的样品杯
（3）状态面板点击“Preview”或点击“Run/Preview”，浓度显示条大小在8%~10%为合适，浓度太低，则需要向样品杯中加注校验品；浓度太高，用电解液进行稀释，直至浓度在合适范围
（4）运行校验品：点击主菜单Run/CalibrateAperture，出现对话框CalibrateSize，在校验品尺寸框中填入校验品的峰值，这个值可以在检验品的附带数据表中查到。
（5）点击“Start”按钮，当校验完成，点击“eptNewKd”，仪器校验完成。
校验文件一般存储在C：\MS目录下
（6）获得平均Kd值。
重复上述步骤
（1）～
（5），得到10个Kd数值，计算10次Kd值的平均值
（7）在小孔Kd值列表中输入平均值。
点击“Run/ChangeApertureWizard”，出现“ChangeApertureTubeWizard”对话框，选中Selectthenewaperturetube100µm后点击ApertureTube按钮，出现“ChangeApertureTube”对话框，选中所使用的小孔管（类型和型号一致），点击EditList，在“EditApertureTubeList”编辑列表中，点击校验的小孔尺寸，输入小孔管的序列号及平均值后，再点击Update即可
（8）校验的确认：样品杯中加适量电解液和数滴校验品－点击Preview确定微颗粒的浓度，接近10％为最佳（浓度低继续添加，浓度高用电解液稀释）－点击“Run/VerifyApertureCalibration”－在校验品尺寸框中输入校验品的峰值－点击“Start”－运行完成，对话框出现校验的状态。
如果校验的确认结果在范围之外，则重新进行校验
五、其它事项
（1）转换脉冲到粒径的设定：点击软件主界面Settings/ConvertPulsestoSizeSettings，出现“ConvertPulsestoSizeSettings”对话框，Sizebins在4～300之间选中；粒径分析范围为小孔管直径的2％～60％；BingSpacing选择数据分析时X轴的单位（分析颗粒直径或体积时，有对数和线性两种；MultisizerⅡEdit.这个功能和MultisizerⅡe是类似的，它是用来修正非垂直通过小孔管的微粒导致的误差，只在窄粒径分布时选用）。
该设置可在数据分析时或分析前进行设置
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（2）保存标准操作方法：SOM设置完成之后，点击软件主菜单Settings/SaveanSOM，文件可以存储在位于C:\MS\SOP目录下的SOM文件夹中。
没有数目的限制，保存下来的文件以便将来直接调用。
调用方法：主菜单中点击Settings，然后点击LoadRunSOM。
要改变标准操作方法，点击SOM下面的Change或Settings/ChangeSOM
（3）运行背景。
背景就是一个没有样品的电解液的分析，也可以称之为“空白分析”。
当分析低浓度的样品时，特别有必要进行背景的分析。
设置方法：（ａ）选择与分析样品时同样的设置和参数；（ｂ）在样品室分析部位放上有清洁电解液的样品杯；（ｃ）状态面板中点击“Start”按钮；（d）完成之后存储实验结果（需给背景实验结果命名）
（4）减去背景：（a）在主菜单中，点击“Settings/LoadBackgroundRun”；（b）选择背景文件，选中背景文件后直接点击“Open”，从现在开始，以后的分析将自动减除背景值。
要想去掉此功能，点击“Settings/RemoveBackgroundRun”
（5）使用400µm或更大的小孔管进行微粒浓度的测定：使用较大孔径的管测定颗粒时，使用体积控制模式没有实际意义（测量泵允许的最大体积为2ml，2ml体积的电解液通过小孔只需较短的时间，由于对于样品的合适浓度有限制，因此所计数的微粒数不足以得到一个好的统计结果，因而结果的重现性就比较差），因此多采用时间控制模式。
为避免高的流速造成的噪音，电解液加入甘油或蔗糖增加黏稠度，降低流速，同时有助于较重颗粒的悬浮。
时间控制模式下，必需人工测定流速之后（单位时间内样品杯中减少的电解液的体积：毫升/秒），才能测定微颗粒的浓度
六、仪器维护：每天分析生物样品、食物及腐蚀性液体的实验结束后，必需清洁仪器管路系统
（1）将电解液容器从仪器脱开
（2）在主菜单，点击System，点击DrainSystem
（3）在排空系统完成之后，放回电解液容器。
连接注明放清洁剂的容器。
对于生物或食物的应用，建议的清洁剂是CoulterClenz或2%的漂白剂。
对于其它的应用，蒸馏水就可以了
（4）在主菜单中，点击System，点击FillSystem
（5）重复步骤
（3）（6）让系统充满清洁液直至下一个工作日
（7）在下一个工作日使用仪器之前，重复步骤1到
4，但这时，要换回电解液。
6 七、数据分析
（1）SampleInformation/SOM设置完成之后，先点击Preview查看样品的浓度，在8％～10％为最佳
（2）点击“Start”，运行结束后，软件主界面右方下侧出现实验结果图。
图形顶端出现文件名（开始实验前进行SOM设置时给文件的命名），下方主菜单RunFile/Edit/View/Graph/Analyze/Display可对实验结果进行统计分析、图形可视化设置、文件存储等操作
（3）Runfile主菜单：①OpenforOverlay将2个或多个文件在同一窗口中打开，图形重叠更能直观判断不同样品之间的差异；②Save保存实验结果；③Saveas将实验结果进行另存；④Delete删除选中的文件；⑤Print打印；⑥PrintReport打印报告；⑦Reportpreview报告预览；⑧Printwindow打印窗口；⑨Exportdata输出数据，文件格式为XLS；⑩GetInfo获取运行该样品的信息，GetfileHistory获取文件历史信息
（4）View菜单：①Graph，选中实验结果以图形展示；②Listing，选中实验结果以列表形式显示；③Size，选中图形横坐标为微粒直径（µm），纵坐标可设置为数量、体积、表面积等参数；④Zoomin，图形放大；⑤Zoomout，图形回复默认值大小
（5）Graph菜单：①Number，表示图形Y轴为微颗粒数量；②Number%，表示不同直径大小的微颗粒数量占总数量的百分比；③Numberperml，每毫升所含微颗粒的数量；④Volume，微颗粒的体积；⑤Volume％，表示不同直径大小的微颗粒体积占总微颗粒体积的百分比；⑥Volumeperml，每毫升所含微颗粒的体积；⑦SurfaceArea微颗粒表面积；⑧SurfaceAreaperml每毫升所含微颗粒的表面积；⑨SurfaceArea％，表示不同直径大小的微颗粒表面积占总微颗粒表面积的百分比；⑩Number+Volume，数量＋体积（Y轴）；＋1）Number%＋Volume％，数量百分比＋体积百分比（Y轴）；＋2)X轴可更改为Volume（体积）、Area（表面积）和Diameter（直径）
（6）Analyze菜单：①Statistics统计分析结果；②LoadBackgroundRun选择运行空白对照样品的文件，点击打开，统计分析结果将自动减除背景值
（7）Display对图形可视化显示设置，包括图形显示种类的选择、X轴和Y轴的设置等方面
八、创建一个标准的操作流程（SOP）
（1）创建SOP之前先创建一个SOM和Preferences文件。
在SOM下Change中对SOM各参数进行设置，设置完成点击“Settings/SaveanSOM”（选择路径、给SOM文件命名）
（2）创建一个Preferences文件，点击主菜单Preferences对各项进行设置，包括PrintedReport
7 /Size/Trend/Pulse/ViewOption………最后点击SavePreferencesAs保存Preferences文件，也可直接点击SavePreferencesAsDefault，保存Preferences为默认值（参数设置为系统默认值）
（3）点击Settings/CreateanSOP，出现对话框，选择SOM文件和Preferences文件后点击Save保存SOP文件（选择保存路径及给文件命名）
（4）下次运行类似属性的实验时，直接点击Settings/LoadanSOP出现对话框，选择SOP文件，点击打开即可
（5）只需对SampleInformation进行编辑设置，无需对SOM进行设置
（6）先点击Preview，样品浓度符合要求，即可点击Start开始开展实验
九、仪器使用过程中注意事项
（1）搅拌子转速控制在10-12，11比较合适
（2）每测量120-140个样品时，最好执行drainsystem一次，以排除气泡
（3）当使用0.9%电解液测量直径在10µm以上的微颗粒时，背景值对结果的影响可以忽略不 计
（4）每次取样品杯时，速度不宜过快，否则容易产生气泡
（5）当界面提示Flowrateistoohigh，此时一般可以采用FlushAperturetube手段解决；当连 续两次提示Flowrateistoohigh，此时可以Fillsystem一次加以解决；超过两次时，建议drainsystem-fillsystem加以解决；问题仍然无法解决时，在主界面菜单中，选择system-Troubleshooting-purgemeteringpump，连续进行五次，然后再fillsystem
（6）机器左侧的废液桶和吸电解液桶，盖子一定要拧紧，如果较松，容易导致系统进入大量气泡，影响机器正常运行
（7）系统主界面左下方的wasteTank一般会在10-12个样品时自动清零，但若等系统自动清理时，会造成样品的重复测量，影响实验进度，同时还造成系统报错，因此建议当水条到达stirrer的最后一个字母时，手动清理废液
（8）系统清理废液时，可以取出样品杯，进行下一步的准备
（9）为提高仪器的正常快速使用，建议悬浮液中尽量不要包含大块的悬浮物（10）搅拌子的位置以位于样品的杯子中下部为适宜，不要靠近底部太近，否则容易产生大量的气泡
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