cdna是什么CIS是什么?

cdna 11

什么叫做DNA重组

. 目的基因的获得。从细菌或动植物细胞中取出染色体的DNA,用内切酶将之切成若干片段,从中鉴定出目的基因。另一种方法是从细胞中分离到信使核糖核酸核(mRNA)用反转录酶的作用获得该基因的互补DNA(cDNA)。如果预先知道某种蛋白质的氨基酸顺序,可以破译它的遗传密码,用DNA合成的方法获得基因。
2. 运载体的选择。运载体一般为质粒,是细菌中染色体以外的DNA。但它不是正常的成分,即没有质粒也完全可以正常生长。质粒是环状的DNA,能自主复制,有若干内切酶切口和某些抗生素的抗药性基因。可以作为转基因的载体。
3. 内切酶切割。将目的基因与质粒DNA如pBR322质粒,用相同的内切酶分别进行切割,结果它们都会形成相同的切口。
4. 连接酶连接。DNA连接酶,常用的有T4。在三磷酸腺苷(ATP)及镁离子存在的条件下,T4连接酶能将切口相同的两种DNA连接起来,形成一个插入目的基因的质粒,叫重组质粒。
5. 宿主菌。宿主菌如大肠杆菌作为受体菌,需要培养到旺盛生长阶段,叫感受态细胞。一般在液体培养基中,37℃振荡培养过夜即可。
6. 重组DNA的转化。将插入目的基因的质粒加入呈感受态的大肠杆菌中,同时加入适当的钙盐(Ca+2),振荡培养。大肠杆菌将重组质粒吞入胞内。这个过程叫转化。
7. 转化子的筛选。pBR322质粒的PstI酶切口处插入目的基因时,则会破坏了抗氨苄青霉素的基因。将转化后的大肠杆菌单个菌落,挑取菌体分别接种于含氨苄青霉素及链霉素的培养基中。如在链霉素培养基上生长而在氨苄青霉素培养基上不能生长的菌落即为转化子

RNA是什么?和DNA有什么区别

RNA(核糖核酸),是存在于生物细胞以及部分病毒、类病毒中的遗传信息载体。RNA由核糖核苷酸经磷酸二酯键缩合而成长链状分子。 与DNA的区别:
一、组成的区别:
1、RNA由核糖核苷酸经磷酸二酯键缩合而成长链状分子。一个核糖核苷酸分子由磷酸,核糖和碱基构成。RNA的碱基主要有4种,即A腺嘌呤、G鸟嘌呤、C胞嘧啶、U尿嘧啶。
2、DNA 分子巨大,由核苷酸组成。核苷酸的含氮碱基为A腺嘌呤、G鸟嘌呤、C胞嘧啶及T胸腺嘧啶;戊糖为脱氧核糖。
二、分类的区别:
1、RNA可分为: mRNA:在蛋白分子合成过程中,作为“信使”分子,将基因组DNA的遗传信息(即碱基排列顺序)传递至核糖体,使核糖体能够以其碱基排列顺序掺入互补配对的tRNA分子,进而合成正确的肽链,实现遗传信息向蛋白质分子的转化。 tRNA:把氨基酸搬运到核糖体上,tRNA能根据mRNA的遗传密码,依次准确地将它携带的氨基酸,掺入正在合成的肽链中,实现肽链的延伸。与正在进行翻译的mRNA结合,而后rRNA将各个氨基酸残基通过肽键连接成肽链进而构成蛋白质分子。 rRNA:一般与核糖体蛋白质结合在一起,形成核糖体。
2、DNA可分为: 单链DNA:大部分DNA以双螺旋结构存在,但一经热或碱处理就会变为单链状态。单链DNA就是指以这种状态存在的DNA。单链DNA在分子流体力学性质、吸收光谱、碱基反应性质等方面都和双链DNA不同。 闭环DNA:没有断口的双链环状DNA,亦称为超螺旋DNA。由于具有螺旋结构的双链各自闭合,结果使整个DNA分子进一步旋曲而形成三级结构。从细胞中提取出来的质粒或病毒DNA都含有闭环和开环这二种分子。 模板DNA:可以是单链分子,也可以是双链分子,可以是线状分子,也可以是环状分子(线状分子比环状分子的扩增效果稍好)。 互补DNA:构成基因的双链DNA分子用一条单链作为模板,转录产生与其序列互补的信使RNA分子,然后在反转录酶的作用下,合成一条与mRNA序列互补的单链DNA,最后再以单链DNA为模板合成另一条与其互补的单链DNA,两条互补的单链DNA分子组成一个双链cDNA分子。
三、功能的区别:
1、RNA的功能: mRNA是依据DNA序列转录而成的蛋白质合成模板;tRNA是mRNA上遗传密码的识别者和氨基酸的转运者;rRNA是组成核糖体的部分,而核糖体是蛋白质合成的机械。 细胞中还有许多种类和功能不一的小型RNA,可调节基因表达。而其他如
I、II型内含子、RNase
P、HDV、核糖体RNA等等都有催化生化反应过程的活性,即具有酶的活性,这类RNA被称为核酶。
2、DNA的功能: DNA有传递遗传信息的功能,而蛋白质则是由 DNA的指令合成的。鉴定亲子关系用得最多的是DNA分型鉴定。人的血液、毛发、唾液、口腔细胞等都可以用于用亲子鉴定,十分方便。 DNA是人身体内细胞的原子物质。每个原子有46个染色体,另外,男性的精子细胞和女性的卵子,各有23个染色体,当精子和卵子结合的时候。这46个原子染色体就制造一个生命,因此,每人从生父处继承一半的分子物质,而另一半则从生母处获得。 参考资料来源:百度百科-核糖核酸 参考资料来源:百度百科-脱氧核糖核酸

内参基因定义是什么啊

原发布者:欧阳曾经 内参即是内部参照,它们在各组织和细胞中的表达相对恒定,在检测基因的表达水平变化时常用它来做参照物。其作用是校正上样量、上样过程中存在的实验误差,保证实验结果的准确性。借助检测每个样品内参的量就可以用于校正上样误差,这样半定量的结果才更为可信。一般要选择一个在处理因素作用的条件下不会发生表达改变的基因作内参。在进行基因研究的过程中,实时反转录PCR也和传统的mRNA定量方法如Northernblot技术等一样,要求使用参照基因以校正转录效率和cDNA用量,弥补制备过程中样本纯度和浓度的差别,使不同样本之间目的基因的比较成为可能,以期获得真实可靠的结果。大多数分析方法中这些差别可通过与内参照比较处理消除。最普通的内参照是内源性参照基因,也叫管家基因。管家基因:又称持家基因(house-keepinggenes)生物体各类细胞中都表达,其产物是对维持细胞基本生命活动所必需的蛋白质编码的基因。如微管蛋白基因、糖酵解酶系基因与核糖体蛋白基因等。是为维持细胞基本生命活动所需而时刻都在表达的基因。管家基因表达水平受环境因素影响较小,而是在个体各个生长阶段的大多数、或几乎全部组织中持续表达,或变化很小。它的表达只受启动序列或启动子与RNA聚合酶相互作用的影响,而不受其他机制调节。管家基因高度保守并且在大多数情况下持续表达,因此管家基因常被用于分子技术--多位点基因分析。内参基因通常是各种看家基因,在细胞内组成稳定性表达,有助于保持细胞的功

cDNA是什么?

反转录DNA 是由RNA反转录得到的,结构上少了内含子,可以用来建立DNA 文库等

什么是逆转录酶?

逆转录酶(reversetranscriptase)又称为依赖RNA的DNA聚合酶。1970年很多研究者从一些致癌RNA病毒中发现这种酶,该酶催化以单链RNA为模板生成双链DNA的反应。由于这一反应中的遗传信息的流动方向正好与绝大多数生物转录生成方向(即DNA模板转录生成RNA的方向)相反,所以此反应称为逆转录作用。逆转录酶具有三种酶活性:①RNA指导的DNA合成反应;②DNA指导的DNA合成的反应;③RNA的水解的反应。 基因工程中有两种商品化的逆转录酶:一种来自纯化的禽成髓细胞瘤病毒(avianmyoblastosisvirus,AMV)提取的;另一种是Moloney鼠白血病病毒(moloneymurineleukemiavirus,Mo-MLV)克隆的逆转录酶编码基因在大肠杆菌的表达产物。这两种逆转录酶有一些区别,禽源逆转录酸在42℃(鸡的正常体温)能有效发挥作用,而鼠源逆转录酶在42℃时则迅速失活。禽源逆转录酶能更有效地拷贝较复杂的mRNA。禽源逆转录酶和鼠源逆转录酶均属多功能酶,它们的共同性质是:①具有RNA指导的DNA聚合酶活性,可以RNA为模板,以寡聚脱氧核糖核苷酸为引物,合成互补的DNA(cDNA);②具有DNA指导的DNA聚合酶活性,但不具DNA聚合酶那样的3′→5′外切酶活性;③具有RNaseH活性,即从5′或3端连续地降解RNA:DNA杂种双链中的RNA部分。 在基因工程中,逆转录酶的主要用途是:①将真核基因的mRNA转录成cDNA,构建cDNA文库,进行克隆实验;②对具有5′突出端的DNA片段的3′端进行填补(补平反应)和标记,制备探针;③代替Klenow大片段,用于DNA序列测定。

什么是ctDNA,dsDNA,ssDNA,cDNA?

ctDNA(小牛胸腺DNA)是一种很常用的双链DNA,dsDNA是双链DNA的简称,ssDNA是单链DNA的简称,plement DNA)表示互补DNA。

什么是甘特图

甘特图又叫横道图,它是以图示的方式通过活动列表和时间刻度形象地表示出任何特定项目的活动顺序与持续时间。

cDNA文库中的基因为什么能在物种间进行基因交流?

cDNA文库中的基因:从生物材料中提取某个时间的mRNA→反转录法→cDNA(再与运载体结合导入受体菌) cDNA文库中的基因能够在种间交流(及一个不同的物种与另一个不同的物种的交流):你知道要利用cDNA文库中的基因,就需要利用基因工程,基因工程能克服生殖隔离的问题,直接将这个基因导入到另一个生物题的细胞中

基因探针的原理和本质是什么?

基因探针的原理和本质是运用一段带有检测标记,且顺序已知的,与目的基因互补的核酸序列,通过分子杂交与目的基因结合,产生杂交信号,能从浩瀚的基因组中把目的基因显示出来。 作为探针的核酸序列至少必须具备以下两个条件:
1、应是单链,若为双链,必须先行变性处理。
2、应带有容易被检测的标记。它可以包括整个基因,也可以仅仅是基因的一部分;可以是DNA本身,也可以是由之转录而来的RNA。 扩展资料: 进行分子突变需要大量的探针拷贝,后者一般是通过分子克隆(molecular cloning)获得的。克隆是指用无性繁殖方法获得同一个体、细胞或分子的大量复制品。 当制备基因组DNA探针前,应先制备基因组文库,即把基因组DNA打断,或用限制性酶作不完全水解,得到许多大小不等的随机片段,将这些片段体外重组到运载体(噬菌体、质粒等)中去,再将后者转染适当的宿主细胞如大肠杆菌。 这时在固体培养基上可以得到许多携带有不同DNA片段的克隆噬菌斑,通过原位杂交,从中可筛出含有目的基因片段的克隆,然后通过细胞扩增,制备出大量的探针。 参考资料来源:百度百科——基因探针

CIS 是什么?

企业识别系统(cis)构成要素   基本上有三者构成:   
1 企业的理念识别(mind identity简称mi);   
2 企业行为识别(behavior identity,简称bi);   
3 企业视觉识别(visual identity, 简称vi).   企业的理念识别一般包括企业的经营信条,企业精神,座右铭,企业风格,经营战略策略,广告,员工的价值观等.   企业的行为识别包括对内和对外两部分.对内包括对干部的教育,员工的教育(如服务态度,接待技巧,服务水准,工作精神等),生产福利,工作环境,生产效益,废气物处理,公害对策,研究发展等;对外包括市场调查,产品开发公共关系,促销活动,流通政策,银行关系,股市对策,公益性,文化性活动等.   企业的视觉识别一般包括基本设计,关系应用,辅助应用三个部分.基本设计包括,如企业名称,品牌标志,标准字,标准色,企业造型,企业象征图案,企业宣传标语,口号,吉祥物等;关系应用包括,如办公器具,设备,招牌,标识牌,旗帜,建筑外观,橱窗,衣着制服,交通工具,包装用品,广告传播,展示,陈列等;辅助应用,如样本使用法,物样使用规格及其他附加使用等.

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