25546－2010 食品安全国家标准食品添加剂富马酸 2010-12-21发布 2011-02-21实施 中华人民共和国卫生部发布 前言 本标准的附录
A、附录B和附录C为规范性附录。
GB25546－2010
I 1范围 食品安全国家标准食品添加剂富马酸 GB25546－2010 本标准适用于以顺丁烯二酸为原料经异构化、结晶、干燥而制得的食品添加剂富马酸。
2规范性引用文件 本标准中引用的文件对于本标准的应用是必不可少的。
凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本标准。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。
3化学名称、分子式、结构式和相对分子质量 3.1化学名称 反丁烯二酸3.2分子式 C4H4O43.3结构式 HOOC
H H COOH 3.4相对分子质量116.07(按2007年国际相对原子质量) 4技术要求 4.1感官要求：应符合表1的规定。
项 目 色泽 气味 组织状态 表
1 要求白色酸味结晶粉末或结晶颗粒 4.2理化指标：应符合表2的规定。
感官要求 检验方法 取适量实验室样品，置于清洁、干燥的白瓷盘中，在自然光线下，目视观察，嗅其气味。

1 表2理化指标 项 目 富马酸（以C4H4O4计，以干基计），w/% 砷（As）/(mg/kg) ≤ 铅（Pb）/(mg/kg) ≤ 灼烧残渣，w/% ≤ 马来酸，w/% ≤ 水分，w/% ≤ 指标 99.5～100.5220.1 0.100.5 GB25546－2010 检验方法附录A中A.4附录A中A.5附录A中A.6附录A中A.7附录A中A.8附录A中A.9
2 GB25546－2010 附录
A A.1警示 （规范性附录）检验方法 试验方法规定的一些试验过程可能导致危险情况。
操作者应采取适当的安全和防护措施。
A.2一般规定 除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和GB/T6682－2008中规定的三级水。
试验方法中所用标准滴定溶液、杂质测定用标准溶液、制剂及制品，在没有注明其他要求时，均按GB/T601、GB/T602和GB/T603之规定制备。
A.3鉴别试验 称取约1mg实验室样品及100mg溴化钾，研成均匀粉末，放入成形器中，压成薄片后用红外光谱仪测定其吸收光谱，其谱图与附录B中图B.1给出的富马酸红外标准谱图一致。
A.4富马酸的测定 A.4.1方法提要 以酚酞为指示剂，用氢氧化钠标准溶液滴定样品水溶液，根据氢氧化钠标准滴定溶液的用量,计算以C4H4O4干基计的总酸含量为富马酸含量。
A.4.2试剂和材料A.4.2.1氢氧化钠标准滴定溶液：c(NaOH)＝0.5mol/L。
A.4.2.2酚酞指示液：10g/L。
A.4.3分析步骤A.4.3.1称取1.0g实验室样品，精确至0.0002g，放入250mL锥形瓶中，加100mL水，加热溶解，冷却后加3滴酚酞指示液，用氢氧化钠标准溶液滴定至微红色，保持30s不褪色为终点。
A.4.3.2在测定的同时，按与测定相同的步骤，对不加试料而使用相同数量的试剂溶液做空白试验。
A.4.4结果计算 富马酸（以C4H4O4计，以干基计）的质量分数w1，数值以%表示，按式(A.1)计算： [(V−V)/1000]cM w1=
0 (1−w)m ×100%
3 …………………………（A.1） 式中：V——试料消耗氢氧化钠标准滴定溶液(A.4.2.1)体积的数值,单位为毫升(mL)；V0——空白试验消耗氢氧化钠标准滴定溶液(A.4.2.1)体积的数值,单位为毫升(mL)；c——氢氧化钠标准滴定溶液浓度的准确数值,单位为摩尔每升(mol/L)；
3 GB25546－2010 m——试料质量的数值,单位为克(g)；w3——A.9测得的水分，(%)；M——富马酸（1/2C4H4O4）的摩尔质量的数值,单位为克每摩尔(g/mol)(M=58.04)。
取两次平行测定结果的算术平均值为报告结果。
两次平行测定结果的绝对差值不大于0.2%。
A.5砷的测定 A.5.1称取1.0g实验室样品，精确至0.01g，试样处理按GB/T5009.76湿法消解进行。
使用吸收液
B，进行限量试验。
A.5.2限量标准液的配制：用移液管移取（2±0.02)mL砷（As）标准溶液（相当于2.0μgAs），与试样同时同样处理。
A.5.3其他按GB/T5009.76中的二乙氨基二硫代甲酸银比色法进行。
A.6铅的测定 A.6.1比色法（仲裁法）按GB/T5009.75进行。
试样处理按干法消解法进行。
临用前，将1mg/mL的铅（Pb）标准溶液稀 释成5μg/mL的铅（Pb）标准溶液。
测定时量取（25±0.02)mL试样溶液（相当于2.5g实验室样品）及
（1±0.02)mL铅（Pb）标准溶液（相当于5μgPb），分别置于125mL分液漏斗中，铅标准溶液中加1%硝酸溶液至25mL。
A.6.2原子吸收光谱法 试样处理按GB/T5009.75干法消解进行。
其他按GB5009.12进行。
A.7灼烧残渣的测定 称取约2g实验室样品，精确至0.0001g，灼烧温度为(800±25)℃。
其他按GB/T9741进行。
取两次平行测定结果的算术平均值为报告结果。
两次平行测定结果的绝对差值不大于0.01%。
A.8马来酸的测定 A.8.1方法提要用高效液相色谱法，在选定的工作条件下，通过色谱柱使样品溶液中各组分分离，用紫外吸收 检测器检测，用外标法定量，计算样品中马来酸的含量。
A.8.2试剂和材料A.8.2.1马来酸：质量分数≥99.0%。
A.8.2.2氢氧化钠溶液：20g/L。
A.8.2.3磷酸溶液：量取磷酸（优级纯试剂）(1±0.02)mL于1000mL容量瓶中，加入100mL甲醇（HPLC级试剂）（可根据柱效调整加入量），加水稀释至刻度，再经0.45μm滤膜过滤。
A.8.3仪器和设备A.8.3.1高效液相色谱系统(HPLC)A.8.3.1.1高压泵：无脉冲，能将流速保持在0.1mL/min～10.0mL/min。
A.8.3.1.2定量环：5μ
L。
A.8.3.1.3紫外光检测器：可变波长。

4 GB25546－2010 A.8.3.1.4数据处理系统：色谱工作站或数据处理机。
A.8.3.2抽滤系统 抽滤系统使用孔径为0.45μm的纤维素酯膜滤纸（用于流动相的预处理）。
A.8.3.3过滤系统 过滤系统使用孔径为0.45μm的纤维素酯膜滤纸（用于样品的预处理）。
A.8.3.4进样器 自动进样器或微量进样器，50μL或100μ
L。
A.8.4色谱分析条件 推荐的色谱柱及典型操作条件见表A.1，马来酸含量测定典型高效液相色谱图见附录C中图 C.1，各组分的相对保留时间见附录C中表C.1。
其他能达到同等分离程度的色谱柱和色谱操作条件 均可使用。
表A.1色谱柱和典型色谱操作条件 色谱柱柱温 柱长250mm，柱内径4.6mm，以硅胶为基质,表面键合C8官能团的非极性填料色谱柱15～60℃，控制精度±1℃ 流动相 磷酸溶液 流动速度/(mL/min) 1.0 检测器检测波长/nm 214 进样量/μ
L 5 A.8.5分析步骤 A.8.5.1马来酸标准样品溶液的制备 称取50mg马来酸，精确至0.0002g,溶于适量水（必要时加入少量氢氧化钠溶液），转移至250mL 容量瓶，用磷酸溶液稀释至刻度。
移取上述溶液（1±0.02)mL,置于100mL容量瓶，用磷酸溶液稀释至刻度，摇匀，经0.45μm滤 膜过滤，再经超声波脱气处理。
A.8.5.2样品溶液的制备 称取0.1g实验室样品，精确至0.0002g,置于50mL容量瓶，以流动相稀释至刻度，摇匀，经0.45μm滤膜过滤，再经超声波脱气处理。
A.8.5.3测定 按高效液相色谱操作规程开机预热,调节温度及流量,达到分析条件并基线平稳后,用微量进样器 取标准样品溶液5μ
L，进样（或自动进样）,记录所得的马来酸的峰面积A2。
用微量进样器取样品溶 液5μ
L，进样（或自动进样）,记录所得的待测物质的峰面积A1。
A.8.6结果计算 马来酸的质量分数w2，数值以%表示，按式(A.2)计算： w=A1×m2×100%2A×m
2 ……………………（A.2） 式中：A1——样品液中待测物质的峰面积；A2——标准样品溶液中马来酸的峰面积；
5 GB25546－2010m2——标准样品溶液中马来酸的进样量，单位为微克(μg)；m——样品的进样量，单位为微克(μg)。
A.9水分的测定A.9.1干燥减量法称取约5g实验室样品，精确至0.0002g。
其他按GB/T6284进行。
取两次平行测定结果的算术平均值为报告结果。
两次平行测定结果的绝对差值不大于0.05%。
A.9.2卡尔·费休法（仲裁法）称取（0.5～1.0）g实验室样品，精确至0.0002g。
其他按GB/T6283进行。
取两次平行测定结果的算术平均值为报告结果。
两次平行测定结果的绝对差值不大于0.05%。

6 附录
B 图B.1给出了富马酸红外标准谱图。
（规范性附录）富马酸红外标准谱图 GB25546－2010 图B.1富马酸红外标准谱图
7 GB25546－2010 附录C（规范性附录）马来酸测定典型高效液相色谱图和各组分的相对保留时间图C.1给出了马来酸测定典型高效液相色谱图。
1——马来酸2——富马酸 图C.1马来酸测定典型高效液相色谱图 表C.1给出了各组分的相对保留时间。
表C.1各组分的相对保留时间 峰序 组分名称
1 马来酸
2 富马酸 相对保留时间0.771
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